樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (通過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 通過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
產(chǎn)品名稱(chēng)
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中性、堿性土壤速效磷測檢測試劑盒
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規格
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盒
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貨號
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XG-0606360
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,避免給您帶來(lái)不必要的損失,請仔細閱讀購買(mǎi)說(shuō)明!
通用規則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(cháng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開(kāi)酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時(shí),避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì )自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機時(shí),倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩定,使用前需自行測定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內,顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay
buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數小時(shí)內檢測完畢。
小氣道平滑肌細胞完全培養基 100mLα-萘黃酮質(zhì)量規格:>98%, 進(jìn)口α-Naphthoflavone
MuM-2B細胞,眼脈絡(luò )色素瘤細胞 光孢短柄帚霉 野生型c-kit受體細胞株;A7d紫脲酸銨質(zhì)量規格:ACSMurexide
趨化因子鹽酸羥胺質(zhì)量規格:ARHydroxylammonium chloride
LLC-MK2(恒河猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H3N2 (A/Hong
Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 3,3'-二甲基聯(lián)萘胺質(zhì)量規格:>97%,進(jìn)分3,3'-Dimethylnaphthidine
小耳豬肺細胞;SEP-L2丹曲林鈉半七水合物質(zhì)量規格:美國進(jìn)口Dantrolene, Salt Hemiheptahydrate
SHH Protein Mouse 重組小鼠 SHH / Sonic
hedgehog 蛋白 (His 標簽)茜素黃Rshēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克
小鼠星形膠質(zhì)細胞(MA)(5×105) CaEs-17, 食管癌細胞株 Human茜速;1,2-二羌基醌 clizcrin;1,2-Dixy7noxy-9,10-cnthrccqnqdionq;C.I. Mordcnt Rqd 11;C.I. PigMqnt
Rqd 83;C.I.58000 7-48-0
APP-PS1(M146L)雙基因轉染CHO細胞株;7WML6.0青安 98+% Cycncmidq
40-04-
14. 心臟細胞系統末端轉移酶shēng huà shì jì容量:500毫克
CL-0035BIU-87(膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2CollagenIV 1g
Worthington原裝
三聚胺Elisa檢測試劑盒96Bathophenanthroline16621紅菲繞啉
蘇丹紅Elisa檢測試劑盒964'-Amino',5'-dichloroacetophenone3714883',5'-二氯'-乙酮
β-激動(dòng)劑Elisa檢測試劑盒962-Amino-chloropurine312-氨基-氯嘌呤
萊克多巴胺Elisa檢測試劑盒96Acetophenone
tosylhydrazone45451苯乙酮對甲苯磺?;?span>