通用規則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(cháng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開(kāi)酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時(shí),避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì )自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機時(shí),倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
產(chǎn)品名稱(chēng)
|
葉綠體分離和葉綠體酶提取測檢測試劑盒
|
規格
|
盒
|
貨號
|
XG-0606335
|
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (通過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 通過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩定,使用前需自行測定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內,顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay
buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數小時(shí)內檢測完畢。
小腦星形膠質(zhì)細胞總RNAHA-c NAdAMP;2’-脫氧腺苷-5‘-單1酸質(zhì)量規格:>99%,BR2'-Deoxyadenosine
5'-monophosphate
J82細胞,膀胱癌細胞 胚肺細胞,WI-38細胞 原代系膜細胞特制基礎無(wú)血清培養基Many types of cells包裝:500/100ml黃素腺嘌呤二核苷酸二鈉鹽質(zhì)量規格:BR,羅氏進(jìn)分FAD-Na2
豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM4GTP;鳥(niǎo)苷-5‘-三1酸鈉鹽質(zhì)量規格:>90%,分子生物學(xué)級GTP, 3 Salt
WISP1 Others Human
WISP1 / CCN4 細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) D-正纈氨酸質(zhì)量規格:>98%,BRD-Norvaline
CL-0313293FT(胚腎細胞)5×106cells/瓶×2D-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽質(zhì)量規格:>99%,BRH-D-Phe-OMe·HCl
L6565細胞,小鼠白血病克隆細胞系 破傷風(fēng)桿菌/梭菌Closidium tetani 猴脈絡(luò )膜-視網(wǎng)膜(內皮)細胞;RF/6A4-硝基芘(>97.0%(HPLC))質(zhì)量規格:>97.0%(HPLC)4-Nitropyrene
CXCL12 Protein Human 重組 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 標簽)2-氨基芴(>97.0%(T))質(zhì)量規格:>97.0%(T)2-Aminofluorene
PIEC(豬髖動(dòng)脈內皮細胞 ) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD10 /
Neprilysin / MME 細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 2-氨基-9-芴酮(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規格:>98.0%(HPLC)2-Amino-9-fluorenone
細胞;Hela P10s-11F2-氨基-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規格:>98.0%(HPLC)(T)2-Amino-9,9-dimethylfluorene
CD81 Others Human CD81
/ TAPA-1 細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 1-代戊炔(>97.0%(GC))質(zhì)量規格:>97.0%(GC)1-Pentynyl
Iodide
三福記號筆 黑色單頭 耐高溫 1311,2-Bis(4'-methyl,2'-bipyridin-yl)ethane9689741,2-雙(4'-甲基,2'-聯(lián)吡啶-基)乙烷
紗布 科研過(guò)濾用15米/卷 (+)-Noe's
reagent8724(+)-核歐沃豪斯效應試劑
施德樓記號筆1,2-Bis(3-indenyl)ethane1865771,2-雙(3-茚基)乙烷
實(shí)驗記錄本(R,R),6-Bis(4-isopropyl-oxazolin-yl)pyridine1318647(R,R),6-雙(4-異丙基-惡唑啉-基)吡啶
實(shí)驗記錄本(R,R),6-Bis(4-phenyl-oxazolin-yl)pyridine12824(R,R),6-雙(4-苯基-惡唑啉-基)吡啶
人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMG-CoAR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):HMGCR, HMG-CoA
reductase, Entrez 3156, LDLCQ3, 3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,
Hydroxymethylglutaryl-CoA reductase Human HMG-CoAR(3-Hydroxy-3-Methylglutaryl
Coenzyme A Reductase) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定
葉綠體分離和葉綠體酶提取測檢測試劑盒人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):MMP10, SL-2,
STMY2, Stromelysin-2, Transin-2 Human MMP-10(Matrix Metalloproteinase 10) ELISA
Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組MMP-10濃度
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,避免給您帶來(lái)不必要的損失,請仔細閱讀購買(mǎi)說(shuō)明!