樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (通過(guò)過(guò)濾)。
4 ). 通過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
產(chǎn)品名稱(chēng)
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線(xiàn)粒體異檸檬酸脫氫酶檢測試劑盒
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規格
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盒
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貨號
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XG-0606330
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,避免給您帶來(lái)不必要的損失,請仔細閱讀購買(mǎi)說(shuō)明!
通用規則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(cháng)期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
4、檢測前,要打開(kāi)酶標儀,使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時(shí),避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì )自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機時(shí),倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。
操作步驟(僅供參考):
1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過(guò) 氧化氫不是非常穩定,使用前需自行測定過(guò)氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。
2.準備樣品:
a,細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP 細胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。
c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內,顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay
buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。
d,血液中的紅細胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃ 3000g離心5min,棄上清,沉淀用預冷的生理鹽水洗滌3次。
e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。
f,(選做)樣品準備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續 計算單位蛋白重量組織或細胞內的CAT含量。
3、 CAT檢測:按照下表設置空白管、自身對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過(guò)高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設置平行孔。
4、分光光度計檢測405nm處吸光度,分光光度計比色杯光徑0.5cm。如果沒(méi)有分光光度計,亦可用酶標儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計檢測。蒸餾水調零,讀取各管吸光度值。一般應數小時(shí)內檢測完畢。
纖維母細胞粘附檢測試劑盒Fibro異阿魏酸(標準品)質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品3-Hydroxy-4-methoxycinnamic
acid
COC1細胞,卵巢癌細胞 大鼠骨肉瘤細胞,VMR106細胞 視網(wǎng)膜muller細胞Many types of
cells包裝:5 × 105方(1ml)異補骨脂查爾酮;補骨脂乙素質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品Isobavachalcone
EB-3(Butt瘤細胞) 5×106cells/瓶×2異補骨脂二氫黃酮(標準品)質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品Isobavachin
HMEpC Pellet 類(lèi)上皮細胞團塊 > 1 mio.cells 髓核細胞cDNAHNPC cDNA異補骨脂素(標準品)質(zhì)量規格:HPLC≥98%,標準品Angelicin
CL-0050Caco-2(結直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2乙酰水楊酸-d4質(zhì)量規格:美國進(jìn)口Acetylsalicylic
Acid-d4
CCC-HPE-2細胞,胚胎胰腺組織來(lái)源細胞 舌癌細胞系,Tca8113-P160細胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類(lèi));P19-CAG-tTA-3C3移液器P200250毫克保存:-20℃
JAR(胎盤(pán)絨毛膜癌細胞) 5×106cells/瓶×22,4,6-三錄芐錄,98% 2,4,6-Trichlorobqnzoyl
chloridq 4136-92-
Promocell C-22070 Myocyte GrowthMedium, 心肌細胞生長(cháng)培養基(即用型) 500ml十二烷基磺酸鈉10克
臍靜脈內皮細胞RNAHUVEC miRNA5 μg順丁希二15毫升
IFNW1 Others Human IFN
omega 1 / IFNW1 細胞裂解液 (陽(yáng)性對照) 2612-2-42-羥基-5-甲氧基本5-metxoxysalicylic acid
維生素B5(泛酸)檢測試劑盒Imidazo[1,2-b]pyridazine7665
全波長(cháng)酶標儀Imatinib1524595伊馬替尼
全自動(dòng)洗板機Imatinib mesylate21277伊馬替尼
全自動(dòng)液晶顯示酶標儀Iloperidone1334547伊潘立酮
流行性出血熱病毒 EHDV檢測 ELISA試劑盒96TIlaprazole1721526艾普拉唑
線(xiàn)粒體異檸檬酸脫氫酶檢測試劑盒人性/通透性增加蛋白(BPI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):BPI Human
BPI(Bactericidal/Permeability Increasing Protein) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組BPI濃度
人糖盞蛋白(GC)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 別稱(chēng):Carbohydrate-Rich
Portion of Platelet Membrane Glycoprotein Ib Alpha Polypeptide Human
GC(Glycocalicin) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清,血漿或其他生物體液中天然及部分重組GC濃度