本試劑盒即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品DNA模板,引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性高,提供陽(yáng)性對照,便于區分假陰性樣品,特異性高,引物是根據指標DNA高度保守區設計,不會(huì )跟其他微生物的DNA發(fā)生交叉反應,既可用于定性檢測,又可用于定量檢測。用于定量檢測時(shí)線(xiàn)性范圍至少為5個(gè)數量級,本產(chǎn)品足夠50次20μL體系的探針?lè )晒舛縋CR反應。
使用方法:
試劑準備(試劑準備區)
稀釋標準曲線(xiàn)樣品(以10E1-10E6拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)。
由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對照,只提供無(wú)傳染性的DNA片段作為陽(yáng)性對照。
1. 標記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2,1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同。
3. 在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的標準曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL 的陽(yáng)性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的標準曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在4號管中加入5 μL 1×10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E4拷貝/μL的標準曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的標準曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。