聚合酶鏈式反應(PCR)通常包括實(shí)驗組和對照組,其區別如下:
實(shí)驗組:
該組是進(jìn)行PCR擴增的樣本組。實(shí)驗組是需要進(jìn)行檢測或者分析的樣品,其PCR擴增反應中包含需要檢測的基因、DNA或RNA等物質(zhì)。實(shí)驗組在PCR反應中需要添加特異性引物以擴增需要檢測的物質(zhì),依據PCR擴增的結果進(jìn)行后續的分析和判斷。
對照組:
該組是為了驗證實(shí)驗組用途、確立PCR反應條件以及排除干擾因素而設立的對照組。一般,對照組可分為正對照組和負對照組:
- 正對照組:含有已知的目標序列或標準品。它的目的是驗證PCR反應體系是否能正常工作、引物是否正確、PCR擴增條件是否設定正確等。正對照物可以是基因片段、質(zhì)粒DNA、RNA、cDNA等標準物質(zhì)。
- 負對照組:該組反應體系中不含特定的目標序列或基因片段,是一種陰性對照。它的主要作用是排除可能存在的污染、假陽(yáng)性或假陰性等錯誤。負對照組在PCR反應中應用純化的水(或緩沖液+酶)代替樣品,進(jìn)行與實(shí)驗組完全一致的PCR反應,以確認任何陽(yáng)性信號的來(lái)源。
通過(guò)對比實(shí)驗組和對照組的PCR反應結果,可以進(jìn)行正式數據分析和判斷。在實(shí)驗的過(guò)程中,對照組是進(jìn)行PCR擴增和檢測過(guò)程中非常重要的一個(gè)環(huán)節,有效地避免了實(shí)驗誤差和假陽(yáng)性、假陰性等錯誤。