產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些？如何解決？
1、抗體孵育時(shí)間過(guò)長(cháng)、抗體濃度高易增加背景著(zhù)色。這可通過(guò)縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來(lái)控制。這是重要的一條。
2、一抗用多克隆抗體易出現非特異性著(zhù)色，建議試用單克隆抗體看看。
3、內源性過(guò)氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高（含血細胞多的組織），需要通過(guò)延長(cháng)滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來(lái)降低背景染色。
4、非特異性組分與抗體結合，這需要通過(guò)延長(cháng)二抗來(lái)源的動(dòng)物免 疫血清封閉時(shí)間和適當增加濃度來(lái)加強封閉效果。
5、DAB孵育時(shí)間過(guò)長(cháng)或濃度過(guò)高。
6、PBS沖洗不充分，殘留抗體結果增強著(zhù)色，在一抗、二抗或SP孵育之后的浸洗尤為重要。
7、標本染色過(guò)程中經(jīng)常出現干片，這容易增強非特異性著(zhù)色。