細胞因子(cytokine,CK)是免 疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì),具有調節固有免 疫和適應性免 疫、血細胞**、細胞生長(cháng)、APSC多能細胞以及損傷組織修復等多種功能。細胞因子可被分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長(cháng)因子等。下面重組細胞因子的特性分述:
1. 真實(shí)性:重組蛋白產(chǎn)品一致經(jīng)過(guò)N末端氨基酸序列分析;必要時(shí)應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhì)譜(MS)檢測其真實(shí)性。
2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產(chǎn)品純度。
3. 生物活性:進(jìn)行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo)活性檢測。
4. 蛋白含量:通過(guò)紫外光譜分析,SDS-PAGE電泳檢測;必要時(shí)應用HPLC定量標準蛋白溶液。
5. 內毒 素:kinetic LAL法檢測內毒 素。
6. 微生物:重組蛋白在裝瓶之前都經(jīng)過(guò)濾除 菌處理。
重組細胞因子的狀態(tài):
市場(chǎng)上主流的重組蛋白產(chǎn)品,多在不含載體蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的條件下,以低鹽的形式做凍干處理,因此微量(多以微克計量)的細胞因子在凍干過(guò)程中會(huì )沉積于管內,形成很薄或不可見(jiàn)的蛋白層,所以建議在收到試劑后,務(wù)必于開(kāi)蓋前先離心20-30秒,使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于凍干館的底部(此時(shí)能否見(jiàn)到白色沉淀均屬正?,F象)。