在Real-time qPCR中，對整個(gè)PCR反應擴增過(guò)程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號，隨著(zhù)反應的進(jìn)行，監測到的熒光信號可以繪制成一條曲線(xiàn)，即為擴增曲線(xiàn)。
熒光擴增曲線(xiàn)一般分為基線(xiàn)期、指數增長(cháng)期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線(xiàn)期。
PCR反應過(guò)程中產(chǎn)生的DNA拷貝數是呈指數形式增加的，隨著(zhù)反應循環(huán)數的增加，zui 終PCR反應不再以指數形式**模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時(shí)期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線(xiàn)性關(guān)系，所以根據zui終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
只有在熒光信號的指數增長(cháng)期，PCR產(chǎn)物量的對數值與起始模板量之間存在線(xiàn)性關(guān)系，可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。