標記物的制備
在酶免yi技術(shù)中制備標記物的抗原應純度高、抗原性完整;制備標記物的抗體應特異性好、效價(jià)高、親和力強、比活性高、能批量生產(chǎn)和易于分離純化。
制備酶標記物的方法應符合簡(jiǎn)單、產(chǎn)量高;避免酶、抗體(抗原)、酶標記物各自形成聚合物;標記反應不影響酶的活性和抗原抗體的免yi 反應性等原則。標記物制備的方法基本屬于兩類(lèi):
一、交聯(lián)法
交聯(lián)法是以一可同時(shí)與酶和抗體(抗原)結合的 交聯(lián)劑作為“橋”,分別連接酶與抗體(抗原)的方法,此類(lèi)方法中目前zui常用的是戊二醛交聯(lián)法,形成的結合物為:酶-戊二醛-抗體(抗原)
二、直接法
直接法是用一活化劑首先將酶活化,被活化的酶分子上的基團直接可與抗體(抗原)結合形成標記物,如過(guò)酸鈉法。形成的結合物為:酶-抗體(抗原)。