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熒光定量PCR儀選擇關(guān)注方面

選擇一款適合自己需求的熒光定量PCR儀時(shí)該關(guān)注方面如下:

1、 儀器的檢測通量

在購買(mǎi)定量PCR儀的時(shí)候要根據實(shí)驗實(shí)的需要來(lái)選擇不同通量的儀器。目前市面上的熒光定量PCR的檢測通量小到16個(gè)多到384個(gè)。如果進(jìn)行一般的基因表達研究或病原體檢測,實(shí)在不必購買(mǎi)昂貴的儀器,96孔的通量足夠用;需要尋找要新藥靶點(diǎn)和ji 病標記的實(shí)驗室可以考慮購買(mǎi)384孔板的儀器。假如經(jīng)費有限無(wú)法購買(mǎi)384孔板儀器的實(shí)驗室,可以考慮購買(mǎi)運行速度快(帶有FAST模塊)的96孔板熒光定量PCR儀。有了高通量的儀器,你會(huì )發(fā)現樣品的制備和小體系、多樣本的PCR體系構建成為限制實(shí)驗速度和結果的頸瓶。

2、 硬件設計特點(diǎn)

熒光定量PCR儀主要有傳統的96孔板式、創(chuàng )xin 的離心式等,每種設計都有它的獨到之處但也都有無(wú)法避免的缺憾。

傳統的96孔板的熒光定量PCR可以容納的樣本量大,而且無(wú)需特殊的耗材。有些傳統的96孔板的儀器采用鹵鎢燈激發(fā)、CCD檢測,這些光學(xué)結構在96孔板的頂部,每個(gè)樣品孔距光源和檢測器的光程各不相同——邊緣效應,對結果產(chǎn)生影響。為了保證精que、準確的實(shí)驗結果,這類(lèi)儀器在實(shí)驗過(guò)程中通常會(huì )使用ROX(一種熒光染料)或專(zhuān)用的Reference dye作為參照校正實(shí)驗結果。鹵鎢燈的使用壽命短、更換成本較高已經(jīng)成為很多用戶(hù)tou 痛的問(wèn)題。在實(shí)驗過(guò)程中鹵鎢燈作為一種熱光源,產(chǎn)生較多熱能對實(shí)驗結果有一定的影響。CCD zui大的優(yōu)點(diǎn)就是可以同時(shí)掃描所有樣品中的熒光信號,但是靈敏度較低,而且同時(shí)檢測樣品間的熒光信號存在干擾。

3、 運行速度

在熒光定量PCR儀的眾多技術(shù)參數中,升降溫速度也是廠(chǎng)家喜歡大力宣傳的指標。更快的升降溫,可以縮短反應進(jìn)行的時(shí)間,而且縮短了可能的非特異性結合、反應的時(shí)間,提高PCR的特異性。

4、 靈活性

大規模繁忙的實(shí)驗室設備固然讓人羨慕,但是常規實(shí)驗室同樣可以有精彩的選擇?,F在的儀器供應商擁有眾多技術(shù)專(zhuān)家,有的還能提供整個(gè)分子生物學(xué)的基礎研究平臺,不但了解、滿(mǎn)足您現在的需求,而且還考慮到了你可能變化的需求——升級和更換模塊。

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