蛋白質(zhì)印跡法(免yi印跡試驗)即Western Blot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免yi遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗方法。其基本原理是在電場(chǎng)的作用下將電泳分離的多肽從SDS-PAGE凝膠轉移至一種固相支持體,然后用這種多肽的特異抗體來(lái)檢測。Western blot一般流程:
蛋白樣品的制備:
1、水溶液提取法:稀鹽和緩沖系統的水溶液對蛋白質(zhì)穩定性好、溶解 度大,是提取蛋白質(zhì)zui 常用的的溶劑,操作相對麻煩,重復性一般;
2、有機溶劑提取法;
3、離心管柱提取法:超快速,易用,高產(chǎn)及重復性強;
4、通過(guò)層析或電洗脫法制備目的蛋白。