細胞復蘇的原則:
在實(shí)際操作中,凍存細胞要進(jìn)行復蘇,再培養傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內,再次形成胞內結晶損傷細胞。
細胞復蘇的主要操作步驟:
1、佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。
2、迅速放入38℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內使其完全融化,然后在無(wú)菌下取出細胞。
3、在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養液后接種于培養瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養,次日更換一次培養液,繼續培養,觀(guān)察生長(cháng)情況。