ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點(diǎn)，并具有操作簡(jiǎn)便、無(wú)放射性危害的優(yōu)點(diǎn)，但在測定中常會(huì )出現一些誤差和問(wèn)題。影響結果的因素有如下方面。
1、試劑盒
（1）抗原、抗體活性對效價(jià)的影響：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價(jià)降低或失活，結果不易判斷。再有ELISA法靈敏度高，對雜質(zhì)的反應靈敏度也高，實(shí)驗中空白對照OD值偏高或假陽(yáng)性。
（2）酶結合物濃度過(guò)高，也會(huì )導致OD值假性增高。
2、 試驗儀器
（1）加樣器是否經(jīng)過(guò)校正，酶免測定血清用血量很少，如手工加樣器的性能不好，吸取樣品不精que，會(huì )使結果忽高忽低。
（2）每次洗板前，應檢查洗板機針孔有無(wú)堵塞。
3、 操作
（1）檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用，試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏，以免造成試驗結果假性降低。
（2）加樣時(shí)注意勿觸及包被板底部，以免擦傷包被物使抗體（抗原）脫落而影響實(shí)驗結果的準確性。
（3）洗滌不充分，會(huì )使結果假性增高，過(guò)分洗滌呈假陰性。
（4）比色時(shí)應保持包被孔底部無(wú)異物、無(wú)水汽，特別是冬季板從37℃水浴箱取出時(shí)，底部留有水汽，應將板底擦干后進(jìn)行比色，水汽或孔內氣泡也會(huì )使OD值升高。
（5）抗原與抗體反應達到完全平衡，依賴(lài)于溫度與時(shí)間。溫度高于45℃易引起失活及標記物脫落，溫度低于4℃，影響反應速度?？傊?，由于ELISA實(shí)驗的影響因素較多，在實(shí)際工作中必須操作規范、仔細，避免和排除各種因素的影響，使之得到準確可靠的檢驗結果。